Ø 1 非洲猪瘟简介
非洲猪瘟(英文名称:African Swine fever,简称:ASF)是由非洲猪瘟病毒(英文名称:African Swine fever virus,简称:ASFV)感染家猪和各种野猪(如非洲野猪、欧洲野猪等)引起一种急性、出血性、烈性传染病。非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟科非洲猪瘟病毒属的重要成员,病毒有些特性类似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直径为175-215纳米,呈20面体对称,有囊膜。基因组为双股线状DNA,大小170-190kb。在猪体内,非洲猪瘟病毒可在几种类型的细胞浆中,尤其是网状内皮细胞和单核巨噬细胞中复制。该病毒可在钝缘蜱中增殖,并使其成为主要的传播媒介。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,该病也是我国重点防范的一类动物疫情。
Ø 2 非洲猪瘟在我国的发病情况
自2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情以来,我国已经在辽宁、安徽、黑龙江、海南等地接连爆发非洲猪瘟疫情。尽管非洲猪瘟传入我国仅几年的时间,但已经在多地接连爆发,造成了巨大的经济损失,而且非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似,只能依靠实验室监测确诊。在目前的情势下,急需一种能对非洲猪瘟进行快速检测的方案!
Ø 3 非洲猪瘟病毒(ASFV)实时等温扩增仪配置清单
项目 |
序号 |
物品名称 |
型号规格 |
单位 |
数量 |
备注 |
主 机 箱 |
1. |
仪器主机 |
HW-ZW16 |
台 |
1 |
|
2. |
仪器使用说明书 |
|
个 |
1 |
|
|
3. |
合格证/保修卡 |
|
本 |
2 |
|
|
4. |
仪器电源线 |
|
根 |
1 |
|
|
5. |
铝合金箱 |
|
个 |
1 |
|
|
配 件 箱 |
6. |
电子天平 |
0-500g |
台 |
1 |
|
7. |
样品杯 |
50mL |
个 |
24 |
|
|
8. |
移液枪 |
1-5ml |
把 |
1 |
|
|
9. |
移液枪枪头 |
1-5ml |
包 |
1 |
|
|
10. |
移液枪 |
100μL-1000μL |
把 |
1 |
|
|
11. |
移液枪枪头 |
100μL-1000μL |
包 |
1 |
|
|
12. |
移液枪 |
10μL-100μL |
把 |
1 |
|
|
13. |
移液枪枪头 |
10μL-100μL |
包 |
1 |
|
|
14. |
移液枪 |
2μL-20μL |
把 |
1 |
|
|
15. |
移液枪枪头 |
2μL-20μL |
包 |
1 |
|
|
16. |
剪刀 |
|
把 |
1 |
|
|
17. |
镊子 |
|
把 |
1 |
|
|
18. |
研钵 |
直径8cm |
个 |
1 |
|
|
19. |
离心机 |
大龙D1008 |
台 |
1 |
|
|
20. |
离心管 |
1.5mL |
个 |
50 |
|
|
21. |
PCR管 |
0.2mL |
个 |
50 |
|
|
22. |
非洲猪瘟病毒荧光等温扩增检测试剂 |
48T/盒 |
盒 |
5 |
|
|
重 要 配 件 |
23. |
漩涡混匀器 |
|
台 |
1 |
|
24. |
畜牧恒温箱 |
-10℃~65℃ |
台 |
1 |
|
|
25. |
高速冷冻离心机 |
LC-LX-HR165A |
台 |
1 |
|
|
26. |
研磨仪 |
|
台 |
1 |
|
|
27. |
移液器(5种型号) |
|
支 |
10 |
|
|
28. |
冰箱 |
|
台 |
1 |
|
Ø 4 非洲猪瘟病毒(ASFV)实时等温扩增仪技术参数
仪器型号 |
HW-ZW16 |
样品通量 |
16x0.2ml,兼容单管和8联管 |
加热方式 |
半导体制冷片结合电性电阻热红外技术 |
温控范围 |
室温~85℃ |
温控精度 |
±0.1℃ |
温度均一性 |
±0.15℃ |
激发光波长 |
第一通道:470nm±10nm |
检测光波长 |
第一通道:520nm±10nm |
激发光 |
高亮度LED |
检测器 |
新型光学检测器,结合数字电路控制,光信号稳定 |
荧光传导方式 |
太空专用光纤传导 |
结果判读方式 |
根据扩增曲线软件自动判读阴阳性 |
结果显示 |
可在机器显示扩增曲线及出峰时间 |
检测时间 |
≤40分钟 |
检测试剂 |
开放式恒温荧光检测试剂 |
操作软件 |
自带软件 |
控制方式 |
触屏控制 |
检测项目 |
可同时最多检测16个项目 |
检测灵敏度 |
10~109拷贝/反应,且样品间无交叉污染 |
仪器分析功能 |
根据所检测样品,直接分析判定阳性或阴性;也可通过标准品进行绝对定量 |
软件设置功能 |
可选择反应程序;可对反应程序进行设置,如可设置反应时间、可在反应过程中修改反应时间(缩短或延长)、可设置不同温度,每个温度档位差为0.1℃;可将反应程序保存为模板;可对不同孔进行重命名;可设置扫描间隔时间,范围为 18~60S,默认间隔为 60S;可设置阴阳性判断阈值;阈值线可上下拉动等 |
工作环境温度 |
18~35℃ |
储存温度 |
-20℃~55℃ |
环境相对湿度 |
≤85% |
工作电压 |
100~240V,50~60Hz |
Ø5 非洲猪瘟病毒荧光等温扩增检测试剂盒技术参数
作用与用途:
用于血液、血球粉、淋巴结、脾脏、扁桃体以及猪肉产品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。
1.规格:
48次/盒;
2.保存条件:
-20℃保存;
3.组成:
荧光等温扩增免提取反应液:1100ul;Bst DNA聚合酶:75ul;阴性对照:1000ul;阳性对照:200ul;矿物油:1000ul;说明书:1份;
4.有效期:
12个月;
5.检测试剂盒应用范围
本试剂盒适用于便携式荧光定量PCR仪检测箱及各种其他型号荧光定量PCR仪;
6.反应体系:
25ul;反应时间:1h;报告基团:FAM;淬灭基团:None;
7.结果判定:
有明确判定标准,被检样品荧光信号有指数型增长,阳性对照Tt值≤45并出现典型的扩增曲线,阴性对照无Tt值并且无扩增曲线即S型扩增曲线,结果成立;被检样品Tt值≤45并出现典型的扩增曲线为阳性;被检样品无Tt值并且无典型扩增曲线为阴性;被检样品Tt值在45-60之间并出现典型的扩增曲线为可疑。对于可疑结果应重新检测,如果样品FAM通道仍有典型S型扩增曲线且Tt值≤60,则判定为阳性,否则为阴性;
8.试剂盒特性
本试剂盒经中国动物疫病预防控制中心评价,诊断敏感性100%,特异性100%;
9.推荐产品
该产品为疫控(诊)【2019】74号文件中推荐的产品;
10. 产品资质
产品生产厂家具有分子生物学类诊断制品GMP车间。