收藏|农药残留检测的主流检测技术大盘点

农药残留关系着食品安全，是重要的食品检测的项目，现阶段食品中农残的检测方法多种多样，除了最常用的光光度法、极谱法、原子吸收光谱法、薄层层析法、气相色谱法、液相色谱法、同位素标记法、核磁共振波谱法、色质联用法外，还有波谱、毛细管电泳、免疫分析和酶抑制法化学法、生物法等多种检测技术。

什么是农药残留

农药残留（Pesticideresidues)， 是农药使用后一个时期内没有被分解而残留于生物体、收获物、土壤、水体、大气中的微量农药原体、有毒代谢物、 降解物和杂质的总称。

施用于作物上的农药，其中一部分附着于作物上，一部分散落在土壤、大气和水等环境中，环境残存的农药中的一部分又会被植物吸收。残留农药直接通过植物果实或水、大气到达人、畜体内，或通过环境、食物链最终传递给人、畜。农残剥离器可以降解 水果蔬菜表面的农药残留。

01 农药残留的生物测定技术（ABBA）

利用指示生物的生理生化反应来判断农药残留及其污染情况。例如，可以用实验室养的敏感性家蝇为测定材料，以其接触待测样品后的中毒程度来表示该样品中的杀虫剂残留；以病菌生长受抑制的程度来检测杀菌剂的残留，以玉米或其它指示植物根长受抑制的程度来检测土壤中磺酰脲类除草剂残留等。该方法无需对样品前处理比较简单快速或无需进行前处理，但对指示生物要求较高，测定结果不能确定农药品种，并且可能出现假阳性或假阴性的情况，该方法可作为快速检验方法用于农产品引起中毒或在现场使用。

02农药残留的理化检测

用于农药残留的化学检测方法有分光光度法、极谱法、原子吸收光谱法、薄层层析法、气相色谱法、液相色谱法、同位素标记法、核磁共振波谱法、色质联用法等。自二十世纪九十年代以来，现代化学分析技术日新月异，许多新技术已进入实用阶段，如毛细管电脉仪技术（CZE），色质联用技术（GC-MS、HPLC-MS）超临界流体色谱技术（SFC），直接光谱分析技术等。这些新技术的应用，大大提高农药残留分析的灵敏度，简化分析步骤，提高了分析效率。但是，这些分析方法有的灵敏度不高，如分光光度法、薄层层析法等。有的需要昂贵的仪器，如色质联用法、核磁共振波谱法等。还有的需要特殊的设备，如同位素标记法等。因此，目前，普遍采用的还是气相色谱法和液相色谱法，它们具有简便、快速、灵敏以及稳定性和重现性好，线性范围宽、耗资低等优点。

（1）气相色谱法（GC）

采用气体作流动相的色谱法，用于挥发性农药的检测，具有高选择性、高分离效能、高灵敏度、快速和特点，是农药残留量检测最常用的方法之一，目前用于农药残留检测的检测器主要有电子捕获检测器（ECD）、微池电子捕获检测器（u-ECD）、火焰光度检测器（FPD）、脉冲火焰光度检测器（P-FPD）、氮磷检测器（NPD）等。

（2）液相色谱法（HPLC）

采用液体作流动相的一种色谱法，它可以分离检测极性强、分子量大及离子型农药，可用于不易气化或受热易分解的农药的检测。近年来，采用新型高效固定相、高压泵和高灵敏度的检测器，柱前和柱后衍生技术、以及计算机联用等，大大提高了检测效率、灵敏度、速度和操作自动化程度。目前用于农药残留检测最多是紫外吸收检测器（UV）、两极管阵列检测器（DAD）和荧光检测器（FLD）。

（3）色质联用法（GC-MS，HPLC-MS）

气相或液相与质谱联用，它既具备了色谱的高分离效能优点，而且具备了质谱准确鉴定化合物结构的特点，可同时达到定性、定量的检测目的，特别适合于农药代谢物、降解物的检测和多残留检测等，不过此法需要贵重仪器且操作繁杂困难，不适合于经常性的检测。一般可用来做最后的确认工作。

（4）超临界流体色谱（SFC）

是以超临界流体作为流动相的色谱体系，超临界流体是指物质处于临界温度和临界压力时的状态，介于气、液态之间，兼有气体和液体的某些物理特性，因此，超临界流体色谱既有气谱的快速、高效、灵敏的特点，又有能检测对热不稳定和大分子化合物的液谱的特点。

（5）毛细管电泳法（CE）

该方法是利用毛细管及高电压（15-30KW）分离各种农药残留物，非常适合于一些难于用传统色谱法分离的离子化样品的分离和分析，比HPLC有高10-1000倍的分析能力，而且所需之缓冲液具有不危害环境之特点，在短时间（30分钟）内就可以完成定性及定量分析。

03常用农药残留的快速检测方法

（1）酶抑制法：

有机磷与氨基甲酸酯农药共为神经系统乙酰胆碱脂酶抑制物，因此可以利用农药靶标酶-乙酰胆用碱酯酶（AChE）受抑制的程度来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药。该方法目前已开发出了相应的各种速测卡和速测仪。该方法检测时，蔬菜中的水份、碳水化合物、蛋白质、脂等物质不会对农药残留物的检测造成干扰，不必进行分离去杂，节省了大量预处理时间，从而能达到快速检测的目的，因此该方法具有快速方便、前处理简单、无需仪器或仪器相对简单，适用于现场的定性和半定量测定，目前的农药残留快速检测就是用了该方法，已上升为农业部行业标准。但该方法只能用于测定有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂，其灵敏度和所使用的酶、显色反应时间和温度密切相关，经酶法检测出阳性后，需用标准仪器检验方法进一步检测，以鉴定残留农药品种及准确残留量。

农药残留检测仪HW-SJ12NC采用酶抑制率法，根据国家标准GB/T5009.199-2003农业部标准（NY/T 448-2001）和国家市场监督管理总局标准（KJ201710）而专门设计的仪器，蔬菜农药残留检测仪其采用酶抑制原理和光电比色法原理研制而成。可快速检测出蔬菜、水果、粮食、茶叶以及土壤中有机磷和氨基甲酸脂类农药残毒。适用于各级农业检测中心、食品安全检测机构、农产品质量安全检测中心、市场监督管理、农贸市场、卫生防疫、环保、蔬菜生产基地、超市、宾馆酒店等领域

（2）免疫分析法：

有放射性免疫分析、酶免疫分析、多组份分析物免疫分析、免疫传感器分析等。最为常用的是酶联免疫法（ELISA法），它主要是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的农药残留检测方法。依靠比色来确定农药残留量。其方法优点是特异性强，灵敏度高，快速简便，可准确定性定量，适用于现场分析；缺点是由于制备抗体较困难，可能会出现假阳性或假阴性现象。

该法利用化学物质在动物体内能产生免疫抗体的原理，先将小分子农药化合物与大分子生物物质结合成大分子，做成抗原，并使之在动物体内产生抗体，对抗体筛选制成试剂盒，通过抗原与抗体之间发生的酶联免疫反应，依靠比色来确定农药残留，它具有专一性强、灵敏度高、快速、操作简单等优点，试剂盒可广泛用于现场样品和大量样品的快速检测，可准确定性、定量。其检测水平可达ng甚至pg级。

ELISA法广泛应用于食品中农药残留如有机磷农药、有机氯农药、除草剂、氨基甲酸酯类农药、兽药残留(如氯霉素)、真菌毒素等的分析检测上。作为一种快速筛选方法，ELISA法在分析复杂基体样品时，因为基体干扰和交联反应等问题，往往存在假阳性的问题。因此如果需要对样品进行定量和确证还需要其他的分析方法。

由于受到农药种类多，抗体制备难度大、在不能肯定样本中的农药残留种类时检测有一定的盲目性以及抗体依赖国外进口等影响，酶联免疫法的应用范围受到较大的限制，目前，我国市场上酶联免疫法成品试剂盒依赖从国外进口。

（3）化学法—速测灵法（纸片法）

“速测灵”法应用的原理是具有强催化作用的金属离子催化剂，使各类有机磷农药（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在催化作用下水解为磷酸与醇，水解产物与显色剂反应，使显色剂的紫红色退去变成无色。主要针对的是有机磷农药的残留检测，特别是甲胺磷、对硫磷农药。这种方法采用化学反应原理，避免了通常所使用生化方法（酶法）的缺点（酶的制备、保存以及反应需比较严格的条件），灵敏度也达到一定的要求。但是此方法主要针对的是甲胺磷、对硫磷等较高毒性的有机磷农药残留的定性检测。

农药残留检测试剂盒（纸片法）符合国家标准GB/T 5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》农业部标准（NY/T 448-2001）和市场监督管理总局发布快检方法KJ 201710《蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、 敌敌畏残留的快速检测》可广泛应用于各级市场监督管理部门、农业系统、食品安全检测机构、农贸市场、农批市场、蔬菜生产基地、商超等

(4)胶体金免疫层析法

胶体金免疫层析技术就是以胶体金为显色媒介，利用免疫学中抗原抗体能够特异性结合原理，在层析过程中完成这一反应，从而达到检测的目的。胶体金免疫层析技术的原理是样品中目标物与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测线（T线）上偶联抗原的免疫反应，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中目标物进行定性检测。可广泛应用于各级市场监督管理部门、农业系统、食品安全检测机构、农贸市场、农批市场、蔬菜生产基地、商超等。

胶体金检测卡结果判读：

目测法：

阴性（－）： T 线显色比C 线深或一致，表明样品中药物浓度低于检测限或不含药物残留；

阳性（＋）：T 线显色比 C 线浅或无显色，表明样品中药物浓度高于检测限；

无 效 ：未出现 C 线，可能操作不当或检测卡已失效。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的检测卡重新测试。

仪器判读：

试剂盒检测方法为定性比色法，用胶体金免疫层析分析仪检测时需核对项目法具体操作方法请参考相关仪器使用说明书

(5)荧光定量法

农药残留检测卡(荧光定量法)具有灵敏度高，操作简便、结果准确、重复性好等优点，通过荧光免疫定量分析仪判读，可以给出定量或者定性的检测结果，避免人为判读带来的误差。应用荧光定量免疫层析技术，在检测卡的反应区预先包被 C 线和 T 线，T 线与 C 线的荧光信号比值和待测样本中的目标物含量成反比。通过与配套荧光免疫分析仪内置的标准曲线对比，可快速简便准确定量各种蔬菜、粮食谷物、乳品及其制品、食用油、加工食品样品中药物残留的含量

农药残留检测卡(荧光定量法)特点：

◇定量检测：检测结果有具体浓度值；无需现场定标，样品随到随检;

◇灵敏度高：检测限比传统胶体金方法高1-3个数量级，比普通荧光方法高2-5倍;

◇检测时间短：20分钟内即可出结果。

◇结果准确：抗基质干扰强，线性范围广;

◇操作简便：样品前处理简单，操作简便，即使非专业人员也很容易掌握;